随着计划一步步落实，整个第一季度都是在紧张和忙碌中度过的，回首这些天的工作，繁忙与成长同在，感谢学校和老师在工作上的支持和帮助，现就具体工作总结如下：

1.科研课题现状(PATP@Au纳米基底的制备及MDA检测)

（1）   金纳米结构介绍

金纳米结构是研究较早的一种纳米材料，在生物学研究中一般将其称为胶体金。它的粒子尺寸一般在1-100 nm之间，随粒径的变化呈现不同的颜色。大量研究表明胶体金能够稳定而迅速地吸附蛋白质，而且蛋白质的生物活性不发生明显改变。它也可以作为探针进行细胞表面和细胞内激素、蛋白质、抗原、多糖等生物大分子的精确定位。

（2）实验材料

①实验试剂

②实验仪器

（3） 实验材料制备

①Au纳米颗粒制备

将0.03%氯金酸100 ml加入于250 ml的烧瓶中加热至沸腾，沸腾后加入100微升 0.25 M/L NaOH调节PH至6.5以上，待溶液沸腾后加入0.1 M/L的柠檬酸钠，加热1h后停止加热冷却至室温，倒入三角瓶用封口膜封住瓶口置于4℃冰箱冷藏保存留待使用。

② PATP制备

称取0.125g 4-氨基苯硫酚放于100 ml的容量瓶中用乙醇配至100 ml得到浓度为0.01 M/L的4-氨基苯硫酚溶液，置于4℃冰箱保存备用

③ PATP@Au纳米颗粒制备

在3ml离心管内加入1mLAu纳米颗粒溶液，100vL巯基苯胺溶液充分混匀，在1080nm处产生新的拉曼峰，预示了PATP与Au纳米颗粒有效结合。

图1 Au纳米颗粒的拉曼图谱

④ MDA制备

四乙氧基丙烷在酸性环境下可以分解生成丙二醛溶液。取505vL四乙氧基丙烷在1% H₂SO₄常温下反应2h。配制的MDA溶液在4℃冰箱环境下保存并在两天内使用避免MDA发生聚集（溶液颜色由无色转变为黄色）。

（4）Au纳米颗粒对MDA的检测

本实验所选用的拉曼光谱仪的参数如下：光谱仪： QEPB2062、积分时间（微秒）：1000000 、平均次数： 1 、平滑度： 0 、去除暗噪声：是 、使用脉冲信号/灯： 是、光谱像素值：1044、激光波长：785 nm、激光频率：300 Hz。

拿一个干净的离心管取上述金纳米颗粒1mL、100vL10^-5 M的4-氨基苯硫酚溶液混匀后静置1 min等待金纳米颗粒与4-氨基苯硫酚相吸附，1 min后再加入100vL丙二醛，摇匀后置于锡箔纸上进行检测并保存数据，以上步骤每个样品重复三次，最后结果取平均值。

有文献记录，在金纳米颗粒制备过程中可以通过改变柠檬酸钠/氯金酸的比值改变金纳米颗粒的半径。当比值处于0.7-4时，金纳米颗粒的半径与比例之间成反比；比值处于4-10时，金纳米颗粒的半径与比例之间成正比；比值大于10时，金纳米颗粒半径不改变。因此，在实验过程中制备了0.7、2、3、4、5、6、7、8、17.5的金纳米颗粒，即依次加入了0.175mL、0.5mL、0.75 mL、1 mL、1.25 mL、1.5 mL、1.75 mL、2 mL、4.375 mL的0.1 M的柠檬酸钠，但经过拉曼光谱扫描后发现金纳米颗粒对MDA并无明显特征吸收（图1），故本实验不采取Au纳米颗粒作为SERS基底进行MDA检测。

2、取得的阶段性成果

课题启动以来，课题组各成员分工明确，恪尽职守，身体力行，已经完成一部分工作，取得一部分记录成果和数据。2021年12月—2021年 3月，课题小组收集数据资料，研究文献，制订了详尽的基底制备方法和研究方案。2021年 3月-2021年5 月，课题组提交申请立项计划书，课题得以顺利申报立项。本项目从2021年5月开始对SERS基底的制备方法进行文献查找及验证，并在后续开展基底的制备、测试、对比工作，最终获得了金纳米颗粒作为基底的测试结果，对结果分析发现金纳米颗粒对MDA检测效果并不好，故本实验将不采用金纳米颗粒作为为基地进行测试。在此期间，课题组各成员一周开一次例会，不断交流，在实验中改进研究方法与细节，并对试验中存在的问题进行探讨以解决实验进展中的问题，保障实验稳步进行。

3、研究中存在的问题

（1）项目成员缺乏研究经验，前期研究中工作开展较慢，工作主要花费在文献查阅和与指导教师确认研究开展的情况。

4、解决方法

科研项目在研究中存在问题证明我们的研究正在向前进展，发现问题存在问题是研究向前推进的必须经历过程。我们要直面问题迎接挑战，克服困难。我们会继续查阅一些相关的文献，从新的角度看待问题，从新的方向寻找解决问题的方法。

1）加快对上一阶段研究中发现问题的解决，推进研究的进程。

2）经巯基苯胺修饰后的金纳米结构具有较好的拉曼增强效应，但对MDA检测并未表现出较好的吸收效应，故项目组成员下一阶段将探索其他基底对MDA的检测效果。

3）在筛选出具有较高的拉曼增强效应的SERS基地后需对体外MDA浓度进行测试。

4）MDA是人体内的有害物质，后期工作应在细胞内进行测试，从而实现MDA在人体内的检测。